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方孔的圆角设计可降低微孔板灯芯效应
人阅读 发布时间:2022-02-23 12:02
灯芯效应能够导致孔间「交叉污染」效果显著,同时也是实验数据错误的重要原因之一。引起灯芯效应的原因主要是毛细现象,孔内的液体可沿着孔壁上升,尤其是方孔直角位置(图 1),最终和相邻孔内的液体混合,导致「污染」,从而引起实验数据不准确。
图 1:384 孔方孔直角位置灯芯效应现象,箭头所示孔内液体上升
对于能够减少使用检测样本体积的 384 孔板和 1536 孔板来说,灯芯效应是主要考虑的干扰因素。引起灯芯效应的主要因素有孔型、实验室环境(如干燥导致的静电会加速灯芯效应)、检测试剂成分和微孔板表面特性等。
研究表明,方孔的圆角设计(图 2)能够极降低孔内液体的毛细现象,从而减少甚至消除灯芯效应。因此,在正式实验前,选择圆角方孔孔型的微孔板是减少甚至消除灯芯效应的首要步骤。
图 2:方孔圆角俯视示意图,384 孔转角圆弧半径为 1 mm
尽管选择方孔圆角的微孔板能够极大地降低灯芯效应,但是使用方孔圆角微孔板实验时避免超过孔的最大工作体积、检测前瞬时离心微孔板、避免实验室异常干燥等更加可以降低灯芯效应。
格瑞纳出品的 384 孔和 1536 孔检测分析微孔板绝大部分都是方孔圆角设计,根据实验需求,直接选用。
参考文献:
1.Douglas S. Auld, et al. Microplate Selection and Recommended Practices in High-throughput Screening and Quantitative Biology. 2020 Jun 1. In: Markossian S, Grossman A, Brimacombe K, et al., editors. Assay Guidance Manual
2.Knebel G. MipTec Proceedings: 1536 Wells: A Versatile Microplate for High Throughput Screening. JALA: Journal of the Association for Laboratory Automation. 1998; 3(4): 40-41.