影响微孔板高通量筛选和成像质量的重要因素（下）

微孔板的选择通常是一个反复的过程，必须平衡各种因素，如自动化兼容性、成本、可用性和性能。这里我们为您总结了微孔板的重要特性，帮助您快速概览可能影响高通量筛选和高内涵成像质量的因素。

前文为您介绍了影响高通量筛选和高内涵成像（HCS）质量的微孔板特性包括颜色、孔形、孔容积、孔密度、孔板材质^[1]，本文继续为您介绍其他影响因素。

表面处理

在孔表面，样品和微孔板之间会发生相互作用。因此，表面特性对孔板的功能起着重要作用。可以通过物理、化学或包被等多种方法改变表面特性，以满足各种需求。

• 未经处理表面 -用于均相检测
• 无结合表面 - 用于敏感的均相检测
• 中等结合力表面- 用于免疫测定
• 高结合力表面 -用于免疫测定
• 链霉亲和素包被表面- 用于免疫测定
• 组织培养（TC）处理--用于一般贴壁细胞培养
• 悬浮 - 用于非贴壁细胞培养
• 加强 TC - 用于培养苛刻的细胞系
• 蛋白质包被（聚(D±L)-赖氨酸（PDL、PLL）、ECM包被--用于满足细胞生长和贴壁的特定需要
• 细胞排斥表面--用于细胞球和类器官的形成

用于生物检测的微孔板

用于生物检测的微孔板应符合以下标准：^[1]

• 在多种温度和湿度条件下的尺寸稳定性
• 平整度
• 与检测试剂的化学和生物兼容性
• 化学或生物吸附性低
• 自发荧光少
• 支持细胞存活、贴壁和生长
• 支持相关光学检测模式
• 无溶剂、金属或化学品浸出

HCS 成像仪器光学元件和微孔板规格

HCS 成像设备的光学元件必须与微孔板的规格相匹配。实验需要考虑微孔板规格的各个方面以及物镜的以下关键特性：

• 放大倍数
• 数值孔径
• 工作距离
• 景深
• 最小 Z 平面间距

其他考虑因素

• 光学各向同性—这对于成像检测和涉及偏振光的检测非常重要，因为各向异性的材料会产生光干扰。

参考文献

[1] Auld DS Ph.D., Coassin PA B.S., Coussens NP Ph.D., et al. Microplate Selection and Recommended Practices in High-throughput Screening and Quantitative Biology. In: Markossian S, Grossman A, Brimacombe K, et al., eds. Assay Guidance Manual. Bethesda (MD): Eli Lilly & Company and the National Center for Advancing Translational Sciences; June 1, 2020.