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一种降低微孔板高通量筛选边缘效应的简单方法
人阅读 发布时间:2021-01-18 15:34
利用培养的细胞进行高通量筛选是广泛采用的一种强有力的实验方法。该方法结合了活细胞应激反应的生物学复杂性和高通量筛选的可扩展性,但是也引入了潜在的「噪音」和易变性,从而导致实验失败。边缘效应是广泛存在的一种现象,会削弱高通量筛选实验数据的可信度。因此,进行细胞培养的高通量筛选实验要尽量降低边缘效应。实际操作过程中,将新接种的细胞培养板置于室温孵育一定的时间再进行后续实验,是一种简单有效的降低边缘效应的方法。
室温孵育降低边缘效应
图 1. 室温孵育 CHO 细胞系不同的时间,进行 Hoechst 33258 染色。
结晶紫染色确定边缘孔细胞的分布
图 2. 结晶紫染色 96 孔细胞培养板实验。细胞接种密度为 105 个/孔。
A)接种后直接置入培养箱;B)接种后置于室温 1 小时候,再置于培养箱;
C)直接置入培养箱边缘孔位;D)接种后置于室温 1 小时候后再置于培养箱孔位
边缘孔细胞的覆盖强度
图3 边缘孔细胞覆盖强度
A)图 2 种 C 图位置孔;B)图 2 种 D 图位置孔
将新接种的细胞培养板室温孵育 1 小时,然后再置于培养箱能够显著降低边缘效应。该方法是一种切实可行、操作非常简单的方法。然后,室温放置时间、培养细胞类型对降低边缘效应各不相同,实际操作中需要优化摸索。